首先我們來(lái)講暗場(chǎng)顯微鏡的結(jié)構(gòu)和特點(diǎn)，為什么叫做暗場(chǎng)顯微鏡，在什么實(shí)驗(yàn)?zāi)苡玫剿?，以及怎么用好它，相信在這篇文章你會(huì)有個(gè)詳細(xì)的了解。
首先是暗視場(chǎng)顯微鏡的原理，在我們的日常生活中，室內(nèi)飛揚(yáng)的微粒灰塵是不易被看見(jiàn)的，但在暗的房間中如果有一束光線從門(mén)縫斜射進(jìn)來(lái)，光束中灰塵便可見(jiàn)了，這是光學(xué)上的丁達(dá)爾現(xiàn)象。暗視場(chǎng)顯微鏡就是利用此原理設(shè)計(jì)的。它的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)主要是使用中央遮光板或暗場(chǎng)聚光器，常用的是拋物面聚光器，使光源的中央光束被阻擋．不能由下而上地通過(guò)標(biāo)本進(jìn)入物鏡。從而使光線改變途徑，傾斜地照射在觀察的標(biāo)本上，標(biāo)本遇光發(fā)生反射或散射，散射的光線投入物鏡內(nèi)，因而整個(gè)視野是黑暗的。在暗場(chǎng)中所觀察到的是被檢物體的衍射光圖像．并非物體的本身，所以只能看到物體的存在和運(yùn)動(dòng)，不能辨清物體的細(xì)微結(jié)構(gòu)。但被檢物體為非均質(zhì)時(shí)，并大于1／2波長(zhǎng)，則各級(jí)衍射光線同時(shí)進(jìn)入物鏡，在某種程度上可觀察物體的構(gòu)造。一般暗視野顯微鏡雖看不清物體的細(xì)微結(jié)構(gòu)，但卻可分辨0.004um以上的微粒的存在和運(yùn)動(dòng)，這是普通顯微鏡(最大的分辨力為0.2um)所不具有的特性，可用以觀察活細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和細(xì)胞內(nèi)微粒的運(yùn)動(dòng)等。
暗視場(chǎng)顯微鏡使用方法：
1.安裝暗場(chǎng)聚光器檢查聚光器的光軸(并非晶體光軸而指幾何光學(xué)光軸)是否與顯微鏡的光路一致。聚光鏡用中心調(diào)節(jié)旋鈕合軸調(diào)整之后，圈錐光束的交點(diǎn)集中到標(biāo)本平面上。
2.放標(biāo)本放置標(biāo)本時(shí)在聚光鏡前透鏡與載物片之間必須浸油。否則來(lái)自標(biāo)本細(xì)節(jié)的反射光和衍射光束在載物玻片表面進(jìn)行全反射。觀察結(jié)果趨于失敗。
3.調(diào)節(jié)聚光鏡焦點(diǎn)操縱光源會(huì)聚透鏡務(wù)使圓錐形光束的交點(diǎn)照射到標(biāo)本平面上。
4.迭擇物鏡用于暗場(chǎng)觀察的物鏡中.油浸系或水浸系的物鏡不能使用。就是干燥系物鏡中也要挑選鏡率在0.85以下為好。如果物鏡鏡口率過(guò)大時(shí)，來(lái)自聚光鏡的部分直射光束進(jìn)入物鏡前透鏡，從而干擾暗視野成像效應(yīng)。如果使用油浸系物鏡觀察時(shí)，必須調(diào)節(jié)物鏡內(nèi)裝孔徑光欄。
5.光強(qiáng)的選擇暗場(chǎng)顯微鏡中光能損失太大。因此必須選擇光強(qiáng)最大的光源，才能取得較好效果。尤其以超聚光鏡觀察膠體微粒運(yùn)動(dòng)時(shí)，光強(qiáng)愈大愈好.
6.浸油的方法聚光鏡與載玻片間浸油時(shí)特別注意是否有氣泡。氣泡可招致暗視野觀察效果的完全破壞。
使用范圍:
暗場(chǎng)生物顯微鏡特別適用于觀察原蟲(chóng)、細(xì)菌的鞭毛、偽足運(yùn)動(dòng)，醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)學(xué)范圍適用于觀察人體體液中螺旋體、尿管形、結(jié)晶或各種粒子